糖原磷酸化酶b（GPb）測試盒微量法

簡要描述：糖原磷酸化酶b（GPb）測試盒微量法公司正在出售的產品：布氏瓊脂進口、國產Brucella Agar250克彎曲桿菌的抗生素敏感性試驗和純化培養布氏肉湯進口、國產Brucella Broth250克用于彎曲桿菌增菌肉湯和布氏瓊脂的制備紅四氮唑沙保羅進口、國產TTC-Sabourand,s Medium250克用于分離真菌，酵母菌等三苯四唑瓊脂基礎進口、國產TTC Agar Base250克彎曲桿菌

產品型號：
廠商性質：經銷商
更新時間：2023-12-23
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產品分類

生化檢測試劑盒

緩沖液光合作用系列維生素系列糖原系列糖異生系列蛋白含量測定系列其它系列土壤系列離子系列糖代謝系列海藻糖系列蔗糖系列淀粉系列脂肪酸代謝系列蛋白酶系列糖酵解系列乙醛酸循環系列三羧酸循環系列氧化磷酸化系列酯酶系列氨基酸代謝系列氮代謝系列氧化與抗氧化系列輔酶Ⅱ系列輔酶Ⅰ系列查看全部產品

詳細介紹

注意事項：

1、試劑二為酶，不可冷凍，使用時在冰上放置。

2、對照管只需要做一管。

3、若對照管吸光值大于2，建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用（10μl試劑二原液+60μl蒸餾水）。

4、SOD為什么有的樣本測定管大于對照管，對照管數值在什么范圍？

對照管的范圍是0.8-2。對照管吸光值過低可能是（1）試劑二或試劑四沒有現配現用；（2)沒有按順序加試劑；（3）反應時間不夠，可以延長反應時間（反應時間30min可以延長到40min）。對照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應倍數。

若出現測定管大于對照管，可能是樣本中雜質的影響太大，為了降低雜質的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測，通?？梢允箿y定正常。計算公式中乘以相應稀釋倍數。

特別提醒：本產品僅供科研研究使用，不得用于人體臨床直接檢測。

產品名稱：糖原磷酸化酶b（GPb）測試盒微量法

產品規格：100管/48樣

檢測方法：微量法

產品貨號：BK-01S6984

產品分類：糖原系列
商品介紹：

測定意義:

糖原磷酸化酶（Glycogen phosphorylase，GP，EC 2.4.1.1)）是糖原分解代謝的關鍵酶，使糖原分子從非還原端逐個斷開α-1，4-糖苷鍵移去葡萄糖基，釋放1-磷酸葡萄糖，直至臨近糖原分子α-1，6-糖苷鍵分支點前4個葡萄糖基處。GP分為有活性的糖原磷酸化酶a（GPa）和無活性的糖原磷酸化酶b（GPb）兩種形式。GPb在一定濃度的腺苷酸（5，-AMP）存在下可被激活。

測定原理：

GP催化糖原和無機磷產生葡萄糖殘基生成糖原和1-磷酸葡萄糖，磷酸葡萄糖變位酶和6-磷酸葡萄糖脫氫酶進一步依次催化NADP還原生成NADPH，在340nm下測定NADPH上升速率，即可反映GP活性。添加一定濃度的腺苷酸（5，-AMP）時測定GP（GPa和GPb）活性，未添加腺苷酸（5，-AMP）時測定GPa活性，GP活性－GPa活性得到GPb活性。

需自備的儀器和用品：

紫外分光光度計/酶標儀、臺式離心機、可調式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。

所需的儀器和用品：

可見分光光度計、1mL 玻璃比色皿（光徑 1cm）、低溫離心機、移液器、研缽、冰和蒸餾水

四、超氧化物歧化酶（SOD）的測定：

建議正式實驗前選取 2 個樣本做預測定，了解本批樣品情況，熟悉實驗流程，避免實驗

樣本和試劑浪費！

1、樣本制備

① 組織樣本：

取約 0.1g 組織（水分充足的樣本可取 0.25g），加入 1mL 提取液，在 4oC 或冰浴進行

勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min，取上清作為待測液。

【注】：若增加樣本量，可按照組織質量（g）：提取液體積(mL)為 1：5~10 的比例進行提取

② 細菌/細胞樣本：

先收集細菌或細胞到離心管內，離心后棄上清；取約 500 萬細菌或細胞加入 1mL

提取液，超聲波破碎細菌或細胞（冰浴，功率 200W，超聲 3s，間隔 10s，重復 30 次）；

12000rpm 4℃離心 10min，取上清，置冰上待測。

【注】：若增加樣本量，可按照細菌/細胞數量（10

4）：提取液（mL）為 500~1000：1 的比例進行提取。 ③ 液體樣本：直接檢測；若渾濁，離心后取上清檢測。

QQ截圖20220307153537.png

實驗方法學：

一、肝素的配制：

市售肝素凍干粉140單位/mg，1克瓶裝，每瓶140，000單位，稱取0.1克肝素凍干粉，加生理鹽水5ml，配成2800單位/ml。取50～100μl濕潤管壁，可抗凝人血3～5ml，血液不會凝固。老鼠血易凝固，所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉，加3ml生理鹽水溶解后，取50～100μl,可抗凝鼠血2～4ml。

肝素抗凝管的制備：取0.1克肝素凍干粉，加2.5ml生理鹽水。取100μl～150μl滴入塑料或玻璃管中，濕潤管壁，低于80℃小烤箱中（可以用烤面包的小烤箱），橫向轉動，每隔5～10分鐘轉動一次，直至干燥后放入4℃保存，可使2～5ml血液不凝固。

二、血液樣本的收集：

全血根據收集的條件，分成不抗凝和抗凝兩種。同時，不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清；抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。

1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1～2小時，直接低速離心分離出血清待用或保存。

2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血，輕輕顛倒充分抗凝后，可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據不同抗凝劑的性能特征，選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。

選擇抗凝的注意點：

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致，同時所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒，充分抗凝，防止部分血液未接觸到抗凝劑而導致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對較多（1ml抗凝全血能分離出0.4～0.5ml血漿）;

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后，解凍時可能會出現絮狀渾濁，如有則需要離心去掉渾濁后

用于測定。

2 ug pBKS pBKS 低溫運輸，-20℃保存

100mL DNEDTA溶液,0.5M,PH8.01

2 ug pFastBac-Dual pFastBac-Dual 低溫運輸，-20℃保存

硫乙醇酸鹽流體(顆粒) 250g

1瓶 Ca759細胞株 Ca759 低溫運輸和保存

細菌總數顯色 Total Genes Chromogenic Medium 250g

100U Sulfolobus DNA 聚合 IV Sulfolobus DNA Polymerase IV -20℃保存

強化梭菌（RCM） Reinforced Clostridium Medium 250g

200mL 自誘導液體（arab啟動子）

2 ug pOG2-cre pOG2-cre 低溫運輸，-20℃保存

NT NT Medium 250g

糖原磷酸化酶b（GPb）測試盒微量法TSPAN12/NET-2 四分子交聯體12抗體（四旋蛋白）規格: 0.2ml

FLT-3/CD135 FMS樣酪激3 規格: 0.2ml

DLK1/Delta/DLL1 (C-terminus) 穿膜蛋白DLK1抗體（C端） 0.1ml

WIF1 Wnt信號抑制因子1抗體規格: 0.2ml

Goat Anti-human IgG/Cy3 Cy3標記的羊抗人IgG 規格: 0.1ml

Cyclin L/CCNL1 周期素L抗體規格: 0.2ml

PLK4/STK18 絲/蘇蛋白激18 規格: 0.2ml

C15orf41 15號染色體開放閱讀框41抗體規格: 0.2ml

Phospho-PLC gamma 1 (Tyr771) 磷酸化磷酯Cγ1抗體規格: 0.1ml

EDNRB 內皮素受體B抗體規格: 0.1ml

phospho-Syntaxin 1a(Ser14) 磷酸化突觸融合蛋白1抗體規格: 0.1ml

NGAL/Lipocalin 2 脂質運載蛋白抗體規格: 0.1ml

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