實(shí)驗(yàn)方法學(xué)：

一、肝素的配制：

市售肝素凍干粉140單位/mg，1克瓶裝，每瓶140，000單位，稱取0.1克肝素凍干粉，加生理鹽水5ml，配成2800單位/ml。取50～100μl濕潤(rùn)管壁，可抗凝人血3～5ml，血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固，所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉，加3ml生理鹽水溶解后，取50～100μl,可抗凝鼠血2～4ml。

肝素抗凝管的制備：取0.1克肝素凍干粉，加2.5ml生理鹽水。取100μl～150μl滴入塑料或玻璃管中，濕潤(rùn)管壁，低于80℃小烤箱中（可以用烤面包的小烤箱），橫向轉(zhuǎn)動(dòng)，每隔5～10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次，直至干燥后放入4℃保存，可使2～5ml血液不凝固。

二、血液樣本的收集：

全血根據(jù)收集的條件，分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí)，不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清；抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。

1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1～2小時(shí)，直接低速離心分離出血清待用或保存。

2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血，輕輕顛倒充分抗凝后，可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征，選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。

選擇抗凝的注意點(diǎn)：

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致，同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒，充分抗凝，防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多（1ml抗凝全血能分離出0.4～0.5ml血漿）;

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后，解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁，如有則需要離心去掉渾濁后

用于測(cè)定。

特別提醒：本產(chǎn)品僅供科研研究使用，不得用于人體臨床直接檢測(cè)。

產(chǎn)品名稱：單寧酶（TAN）測(cè)試盒微量法

產(chǎn)品規(guī)格：100管/48樣

檢測(cè)方法：微量法

產(chǎn)品貨號(hào)：BK-01S6458

產(chǎn)品分類：氧化與抗氧化系列
商品介紹：

所需的儀器和用品：

可見分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿（光徑 1cm）、低溫離心機(jī)、移液器、研缽、冰和蒸餾水

四、超氧化物歧化酶（SOD）的測(cè)定：

建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測(cè)定，了解本批樣品情況，熟悉實(shí)驗(yàn)流程，避免實(shí)驗(yàn)

樣本和試劑浪費(fèi)！

1、樣本制備

注意事項(xiàng)：

1、試劑二為酶，不可冷凍，使用時(shí)在冰上放置。

2、對(duì)照管只需要做一管。

3、若對(duì)照管吸光值大于2，建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用（10μl試劑二原液+60μl蒸餾水）。

4、SOD為什么有的樣本測(cè)定管大于對(duì)照管，對(duì)照管數(shù)值在什么范圍？

對(duì)照管的范圍是0.8-2。對(duì)照管吸光值過低可能是（1）試劑二或試劑四沒有現(xiàn)配現(xiàn)用；（2)沒有按順序加試劑；（3）反應(yīng)時(shí)間不夠，可以延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間（反應(yīng)時(shí)間30min可以延長(zhǎng)到40min）。對(duì)照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說(shuō)明書稀釋相應(yīng)倍數(shù)。

若出現(xiàn)測(cè)定管大于對(duì)照管，可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大，為了降低雜質(zhì)的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測(cè)，通常可以使測(cè)定正常。計(jì)算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。

1g  Heparin Sodium Salt  4℃避光保存

50T 副溶血性弧菌PCR檢測(cè)試劑盒  低溫運(yùn)輸，-20℃保存

100mL 一管式TMB顯色液B (沉淀型)  One-Tube TMB Chromogenic Solution 2-8℃避光保存

2 ug SuperCos 1 SuperCos 1 低溫運(yùn)輸，-20℃保存

1套 硅膠膜DNA離心吸附柱（大提） Silica Spin Column Maxiprep 常溫

2 ug pAcGFP1-1 pAcGFP1-1 低溫運(yùn)輸，-20℃保存

營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板（9cm） Nutrient Agar 10個(gè)/包

1瓶 Bel-7402/FU細(xì)胞株 Bel-7402/FU 低溫運(yùn)輸和保存

Half-Fraser培養(yǎng)基顆粒 Half-Fraser Medium 225ml/袋*10

1000U p19 siRNA 結(jié)合蛋白  p19 siRNA Binding Protein -20℃保存

250mL NP40 Lysis Buffer，Low Salt（低鹽型NP40裂解液） NP40 Lysis Buffer，Low Salt 常溫保存

單寧酶（TAN）測(cè)試盒微量法PNPO  磷酸吡哆醇氧化抗體 規(guī)格: 0.2mlSLAMF9  CD2F-10抗體 規(guī)格: 0.2ml

phospho-MAP1LC3A(Ser12)  磷酸化自噬微管相關(guān)蛋白輕鏈3抗體 規(guī)格: 0.1mlGoat Anti-rabbit IgG/Bio  標(biāo)記的羊抗兔IgG 規(guī)格: 0.1ml

Retinoic acid induced 17  維甲酸誘導(dǎo)蛋白17抗體 規(guī)格: 0.2mlCYP46  24S－羥化 規(guī)格: 0.2ml

FLAG Tag(CT)  FLAG Tag標(biāo)簽抗體（C端） 規(guī)格: 0.1mlphospho-ATM(Ser1981)  磷酸化毛細(xì)管擴(kuò)張性共濟(jì)失調(diào)癥突變蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml

TEM7R/Plxdc2  瘤管內(nèi)皮標(biāo)記相關(guān)蛋白質(zhì)7抗體 規(guī)格: 0.2mlPhospho-MAPKAPK2 (Thr222)  磷酸化絲裂原活化蛋白激活化的蛋白激2抗體 規(guī)格: 0.1ml

phospho-ATG3 (Tyr18)  磷酸化自噬相關(guān)蛋白3抗體 規(guī)格: 0.1mlC11orf73  11號(hào)染色體開放閱讀框73抗體 規(guī)格: 0.2ml

Phospho-TAK1(Thr187)  磷酸化轉(zhuǎn)化生因子β活化激1 規(guī)格: 0.1mlCOLEC11  凝集蛋白家族11抗體 規(guī)格: 0.2ml

Nogo-A  軸索過度生抑制因子-A抗體 規(guī)格: 0.1mlPhospho-FHIT (Tyr114)  磷酸化脆性組三聯(lián)體抗體 規(guī)格: 0.1ml

BRLF1  立即早期基因BRLF1抗體（鼻咽基因） 0.2mlPhospho-HP1 gamma (Ser93)  磷酸化染色質(zhì)相關(guān)蛋白1-γ抗體 規(guī)格: 0.1ml

TSARG4  生細(xì)胞凋亡相關(guān)基因4抗體 規(guī)格: 0.1mlDUX3  DUX3蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

MARCH8  膜相關(guān)環(huán)指蛋白8抗體 規(guī)格: 0.2mlPKA gamma  蛋白激Aγ抗體 規(guī)格: 0.2ml

MDGA2  神經(jīng)元膜糖蛋白錨定蛋白2抗體 規(guī)格: 0.2mlKCNA5  鉀電壓閥門通道混合器相關(guān)亞家族成員5抗體 規(guī)格: 0.2ml